Видео: ДНХ клончлох векторын үүрэг ихэвчлэн юу вэ?
2024 Зохиолч: Miles Stephen | [email protected]. Хамгийн сүүлд өөрчлөгдсөн: 2023-12-15 23:39
Маш олон төрөл байдаг клончлох векторууд , гэхдээ хамгийн их ихэвчлэн ашигласан нь генийн инженерчлэгдсэн плазмидууд юм. Хувилах ерөнхийдөө эхлээд гэдэсний савханцар ашиглан хийдэг ба клончлох векторууд E. coli-д плазмид, бактериофаг (фаг λ гэх мэт), космид, бактерийн хиймэл хромосом (BACs) орно.
Мөн ДНХ клонд вектор гэж юу вэ?
Молекулын хувьд клончлох , a вектор нь ДНХ молекул нь гадны генетик материалыг өөр эсэд зохиомлоор зөөвөрлөх хэрэгсэл болгон ашигладаг бөгөөд үүнийг хуулбарлах ба/эсвэл илэрхийлэх боломжтой (жишээлбэл, плазмид, космид, ламбда фагууд). А вектор гадаад агуулсан ДНХ рекомбинант гэж нэрлэдэг ДНХ.
Мөн та векторыг хэрхэн клон хийх талаар мэдэх үү? Туршилтын журам
- ПГУ-ыг ажиллуулж, ПГУ-ын бүтээгдэхүүнийг цэвэршүүл: Оруулсан ДНХ-ээ олшруулахын тулд ПГУ-ыг ажиллуул.
- ДНХ-ээ задлах:
- Гель цэвэршүүлэх замаар оруулга болон вектороо тусгаарлана:
- Вектор дээрээ оруулгыг холбоно уу:
- Өөрчлөлт:
- Бэлэн плазмидыг тусгаарлах:
- Плазмидыг дараалалаар баталгаажуулна уу:
Үүнтэй холбогдуулан pBR322 хэрхэн клончлох вектороор ажилладаг вэ?
pBR322 Плазмид pBR322 зорилгоор ашигласан анхны плазмидын нэг юм клончлох . Энэ нь тетрациклин ба ампициллинд тэсвэртэй генийг агуулдаг. Тодорхой хязгаарлалтын газруудад ДНХ оруулах чадна тетрациклины генийг идэвхгүйжүүлэх (үүнийг оруулгад идэвхгүйжүүлэх нөлөө) эсвэл ампициллинд тэсвэртэй байх.
Аль техник нь ДНХ-ийн тодорхой хэсгийн олон хуулбарыг маш хурдан гаргах боломжийг олгодог вэ?
Полимеразын гинжин урвал
Зөвлөмж болгож буй:
ДНХ-ийн репликацид ДНХ полимераза ямар үүрэг гүйцэтгэдэг вэ?
Тайлбар: ДНХ полимераз нь хэд хэдэн ДНХ полимераза хэлбэрээр байдаг фермент юм. Эдгээр нь ДНХ-ийн хуулбар, ДНХ-ийн засвар, засвар үйлчилгээнд оролцдог. Хуулбарлах процессын явцад ДНХ полимераз нь РНХ праймер дээр нуклеотидуудыг нэмдэг
ДНХ-ийн репликацид ДНХ лигаза ямар үүрэг гүйцэтгэдэг вэ?
ДНХ-ийн лигаза нь давхар судалтай ДНХ молекулын нурууны хэвийн бус байдал, хугарлыг засдаг фермент юм. Энэ нь гурван ерөнхий үүрэгтэй: ДНХ-ийн засварыг битүүмжлэх, рекомбинацын фрагментуудыг битүүмжлэх, Оказаки фрагментуудыг холбодог (хоёр судалтай ДНХ-ийн хуулбарлах явцад үүссэн жижиг ДНХ фрагментүүд)
Ген клончлох асуулт гэж юу вэ?
Генийн клонжуулалт. Организмаас гаргаж авсан ДНХ-ээс сонирхсон генийг байршуулж, хуулбарлах үйл явц. Генийн клончлолд: - ДНХ-г таслах хязгаарлах ферментийн хэрэглээ орно. - Дараа нь ДНХ-ийн лигаза ашиглан ДНХ-ийн хэсгүүдийг эзэн эсэд нэвтрүүлэхээс өмнө нэгтгэдэг
Клончлох үе шатууд юу вэ?
Сонгодог хязгаарлах ферментийн задаргаа ба ligation клончлолын протоколд аливаа ДНХ-ийн фрагментийг хувилах нь үндсэндээ дөрвөн үе шатыг хамардаг: сонирхож буй ДНХ (эсвэл зорилтот ДНХ) -ийг тусгаарлах, холбох, шилжүүлэн суулгах (эсвэл хувиргах) ба. скрининг/сонголтын журам
Клончлох нь митоз эсвэл мейоз уу?
Хүн болон бусад ихэнх амьтдад эсийн хуваагдал нь митоз ба мейоз гэж нэрлэгддэг хоёр арга зам байдаг. Эс митозоор хуваагдахдаа тус бүр нь ижил тооны хромосомтой хоёр клон үүсгэдэг. Эс мейозын замаар хуваагдахдаа бэлгийн эс гэж нэрлэгддэг дөрвөн эсийг үүсгэдэг