Холбогчийг хувиргахад хэр үнэтэй вэ?
Холбогчийг хувиргахад хэр үнэтэй вэ?

Видео: Холбогчийг хувиргахад хэр үнэтэй вэ?

Видео: Холбогчийг хувиргахад хэр үнэтэй вэ?
Видео: Хурга өсгөхөд бид ямар үнэтэй вэ? (ВАННИЙГЭЭС ЗАХ ХҮРТЭЛ): Vlog 233 2024, Арваннэгдүгээр
Anonim

Өөрчлөлт . 1-5 мкл-ийн хооронд нэмнэ боох чадварлаг эсүүд рүү холих хувиргалт . Өргөтгөсөн боох PEG нь дотогшоо унахад хүргэдэг хувиргалт үр ашиг (хурдан Лигация Иж бүрдэл). Том хэмжээний барилга байгууламжид (>10,000 bp) цахилгаан сийрэгжилтийг хийхийг зөвлөж байна.

Эндээс хэлэхэд, хувиргахад надад хэр их боох бүтээгдэхүүн хэрэгтэй вэ?

Өөрчлөлт . 1-5 мкл-ийн хооронд нэмнэ боох чадварлаг эсүүд рүү холих хувиргалт . Өргөтгөсөн боох PEG нь дотогшоо унахад хүргэдэг хувиргалт үр ашиг (хурдан Лигация Иж бүрдэл). Том хэмжээний бүтээцэд (>10,000 bp) цахилгаан сийрэгжилтийг хийхийг зөвлөж байна.

Дараа нь асуулт гарч ирнэ, Лигаци ба хувиргалт гэж юу вэ? Ердийн клончлолын туршилтаар судлаачид эхлээд плазмид гэж нэрлэгддэг дугуй хэлбэртэй ДНХ-д ген гэх мэт ДНХ-ийн хэсгийг оруулдаг. Энэ алхам нь хязгаарлах фермент болон ДНХ лигазыг ашигладаг бөгөөд үүнийг a гэж нэрлэдэг боох . Дараа нь а боох , дараагийн алхам нь ДНХ-ийг бактери руу шилжүүлэх гэж нэрлэгддэг процесс юм хувиргалт.

Дараа нь хэн нэгэн нь бооход хэр хэмжээний ДНХ хэрэгтэй вэ гэж асууж магадгүй юм.

Үр дүнтэй байхын тулд вектор + оруулгын нийт концентраци 1-10 Μг/мл хооронд байх ёстой боох . Вектор: 1:1 ба 1:10 хооронд молийн харьцааг оруулахыг зөвлөж байна (ердийнх нь 1:3). Хэрэв та өөртөө итгэлгүй байгаа бол ДНХ концентраци, янз бүрийн харьцаатай олон ligations хийх.

Та холбосон урвалыг хэр удаан хадгалах боломжтой вэ?

Холбоо барих боломжтой тасалгааны температурт эсвэл сэрүүн (12-16 ° C гэж бодоорой) шөнө эсвэл бүр хэдэн өдрийн турш хийж болно; Хэрэв чи үнэхээр завгүй байна. Чи чадна бас холбогчийг хадгалах хөргөгчинд хийгээд дараа нь гаргаж аваад тасалгааны температурт холбоно урт шаардлагатай бол.

Зөвлөмж болгож буй: