Агуулгын хүснэгт:

Northern blot тестийг юунд ашигладаг вэ?
Northern blot тестийг юунд ашигладаг вэ?

Видео: Northern blot тестийг юунд ашигладаг вэ?

Видео: Northern blot тестийг юунд ашигладаг вэ?
Видео: ZEITGEIST: MOVING FORWARD | OFFICIAL RELEASE | 2011 2024, Арваннэгдүгээр
Anonim

The хойд толбо , эсвэл РНХ толбо , техник юм ашигласан молекул биологийн судалгаанд дээжинд РНХ (эсвэл тусгаарлагдсан мРНХ) илрүүлэх замаар генийн илэрхийлэлийг судлах.

Үүнтэй адилаар Northern blot юу илрүүлдэг вэ?

А хойд толбо хэрэглэдэг лабораторийн арга юм илрүүлэх РНХ-ийн холимог дунд тодорхой РНХ молекулууд. Хойд толбо тодорхой генийн РНХ илэрхийллийг хэмжихийн тулд тодорхой эд эс эсвэл эсийн төрлөөс авсан РНХ-ийн дээжийг шинжлэхэд ашиглаж болно.

Дараа нь асуулт бол өмнөд ба хойд blotting гэж юу вэ? Өмнөд ба хойд толбо эрлийзжүүлэх. Өмнөд толбо Гибридизаци гэдэг нь гель электрофорезоор тусгаарлагдсан ДНХ-ийн тодорхой хэсгүүдийг илрүүлэхийг хэлнэ (Зураг 1). -ийн дасан зохицох Өмнөд толбо байна Хойд толбо , үүнд РНХ молекулууд ДНХ-ийн оронд гельээр дамжин электрофорез болдог.

Түүнээс гадна хойд толбо хэрхэн яаж хийдэг вэ?

Хойд анализ хийх үе шатууд нь:

  1. РНХ тусгаарлалт (нийт эсвэл поли(А) РНХ)
  2. Сорьц үүсгэх.
  3. Денатурат агароз гель электрофорез.
  4. Хатуу дэмжлэг, хөдөлгөөнгүй байдалд шилжүүлэх.
  5. Урьдчилан эрлийзжүүлэх, зондоор эрлийзжүүлэх.
  6. Угаах.
  7. Илрүүлэх.
  8. Хөрс тайлах, дахин шалгах (заавал биш)

Southern blot танд юу хэлэх вэ?

Өмнөд толбо цус, эдийн дээжинд ДНХ-ийн тодорхой дарааллыг илрүүлэхэд ашигладаг лабораторийн арга юм. ДНХ-ийн дээжийг гель электрофорез ашиглан салгах хэсгүүдэд хуваахад хязгаарлалтын фермент ашигладаг. ДНХ-ийн хэсгүүд нь гельээс мембраны гадаргуу руу шилждэг.

Зөвлөмж болгож буй: